一、通道數(shù)選擇:實驗需求與擴展性的平衡
基礎(chǔ)需求匹配
單通道至四通道:適用于常規(guī)基因表達分析、病原體檢測(如新冠助力各行、HPV分型)便利性,例如LightCycler96的四通道設(shè)計可覆蓋FAM/VIC/ROX/Cy5等常用染料組合。
五通道及以上:支持高復(fù)雜度多重PCR(如同時檢測5種以上靶標)最深厚的底氣,需結(jié)合儀器是否支持卡夾式光路設(shè)計(如QuantStudio™5的6通道系統(tǒng)協同控製,可通過擴展卡夾實現(xiàn)通道升級)。
未來擴展性
選擇模塊化通道設(shè)計(如Bio-RadCFX96的4通道系統(tǒng))品質,避免一次性投入過高成本利用好。
優(yōu)先選擇兼容主流熒光染料(FAM/HEX/ROX/Cy5)的儀器,減少染料適配成本解決問題。
二系列、檢測靈敏度:核心參數(shù)與實驗場景的適配
靈敏度指標
單拷貝檢測能力:如Archimed系列可檢測1拷貝基因,適用于低豐度靶標(如ctDNA相互配合、病毒載量監(jiān)測)慢體驗。
分辨率:1.33倍至1.5倍的拷貝數(shù)差異檢測能力,滿足腫瘤MRD評估智能化、基因突變篩查等高精度需求科技實力。
靈敏度優(yōu)化技術(shù)
溫控系統(tǒng):±0.25℃的溫控精度(如QuantStudio™5)可減少非特異性擴增,提升低濃度樣本信號穩(wěn)定性建設。
光學(xué)系統(tǒng):采用菲涅爾透鏡或高強度固態(tài)光源(如LightCycler96的白光LED)在此基礎上,增強熒光信號采集效率。
三前來體驗、選型決策樹
常規(guī)實驗:四通道+單拷貝靈敏度(如LightCycler96)自主研發,覆蓋基因表達、SNP分型更加廣闊。
復(fù)雜多重PCR:五通道及以上+高分辨率(如QuantStudio™5)損耗,支持腫瘤多靶標檢測。
超敏檢測:六通道+單拷貝靈敏度(如Archimed系列),適用于液體活檢積極影響、病原體低載量監(jiān)測宣講活動。
結(jié)論:選型需結(jié)合實驗復(fù)雜度、樣本豐度及預(yù)算工藝技術,優(yōu)先選擇通道可擴展效率、靈敏度可驗證的儀器,并通過預(yù)實驗驗證實際性能近年來。