BD 流式細胞儀是集激光技術(shù)落實落細、電子物理切實把製度、光電測量工藝技術、計算機及細胞熒光化學技術(shù)于一體的多參數(shù)細胞分析儀器，廣泛應(yīng)用于生命科學研究和臨床診斷領(lǐng)域構建。其核心功能是通過液流系統(tǒng)將細胞或微粒排列成單列創新科技，依次通過激光束檢測點，利用光學系統(tǒng)激發(fā)熒光標記物并捕獲散射光與熒光信號共創輝煌，最終通過電子系統(tǒng)將光信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號進行多維度分析異常狀況。

　　其液流系統(tǒng)由鞘液管研究、樣品管和噴嘴組成，通過流體動力學聚焦使細胞懸浮液形成直徑約3-10μm的穩(wěn)定液柱應用創新，確保每個細胞獨立通過激光檢測區(qū)提高。光學系統(tǒng)采用氬離子激光器（488nm）或氪離子激光器（647nm），激發(fā)細胞表面或內(nèi)部的熒光染料（如FITC的特性、PE）交流。前向散射光（FSC）反映細胞體積，側(cè)向散射光（SSC）揭示胞內(nèi)顆粒結(jié)構(gòu)提供堅實支撐，而熒光信號強度則對應(yīng)標記抗原或核酸的濃度還不大。光電倍增管（PMT）將光信號轉(zhuǎn)換為電脈沖，經(jīng)模數(shù)轉(zhuǎn)換后生成FCS格式數(shù)據(jù)文件信息化技術。

　　BD 流式細胞儀在實驗前準備：

　　1發揮作用、儀器校準與質(zhì)檢

　　開機預(yù)熱：提前30分鐘開機，使激光和檢測系統(tǒng)穩(wěn)定逐步顯現。

　　光路校準：使用標準熒光微球（如Flow Check或CytoGlow）調(diào)整激光延遲銘記囑托、靈敏度及PMT電壓，確保液流居中自動化裝置。

　　檢查背景噪聲：運行緩沖液（如PBS）試驗，確保散射光和熒光通道的基線平穩(wěn)，無異常信號開展攻關合作。

　　2、樣本制備

　　細胞濃度：調(diào)整細胞濃度至5×10?~1×10?cells/mL（過高易導(dǎo)致堵塞預下達，過低降低檢測效率）的有效手段。

　　單細胞懸液：機械法（研磨）或酶消化法（如膠原酶）處理組織，過濾去除團塊方案。

　　3關鍵技術、染色與孵育：

　　表面抗體：4℃避光孵育15~30分鐘，PBS洗滌后重懸深入。

　　胞內(nèi)染色：破膜劑（如BD Fix&Perm）處理后孵育胞內(nèi)抗體技術研究。

　　活性染料：如PI（死細胞染色）或Calcein-AM（活細胞標記）。

　　4開展研究、對照設(shè)置：

　　空白對照：未染色的細胞用于確定熒光閾值姿勢。

　　單標對照：單個熒光標記的樣本用于調(diào)整補償（Compensation）。

　　同型對照：用于排除非特異性結(jié)合（如ISO型抗體）培養。